27.02.2011
При окраске
Фазе фуксинофильных при окраске по Ван-Гизону волокон (рис. 31) соответствует преобладание «зрелых» коллагеновых фибрилл, их упорядочение с постепенным приобретением одинаковой ориентации (рис. 32). Можно видеть образование «зрелых» фибрилл путем соединения более тонких «незрелых» коллагеновых фибрилл, однако агрегации микрофибрилл в фибриллы не обнаруживается. Хлопьевидный материал и небольшое число микрофибрилл остаются внутри волокон между рыхло расположенными коллагеновыми фибриллами, но главным образом между волокнами. По мере созревания и все более компактного расположения коллагеновых фибрилл и волокон количество хлопьевидного материала и микрофибрилл заметно уменьшается, что отмечается также при развитии тканей в эмбриогенезе [Haust М. D., 1965; Morse D. Е., Low F. N., 1974]. Однако и в зрелой ткани рубца, кожи и других органов микрофибриллы и хлопьевидный материал остаются непременным компонентом, составляя, по-видимому, ультраструктурную основу основного цементирующего вещества. Природа хлопьевидного материала и микрофибрилл еще не совсем ясна, однако данные электронной гистохимии в сочетании с ферментативным анализом указывают на то, что они в основном состоят из гликопротеинов и протеогликанов. Так, например, данные С. W. Kischer и соавт. (1974), R. Eisenstein и соавт. (1976) свидетельствуют об исчезновении хлопьевидного материала при обработке ткани гиалуронидазой и хондроитин – азой. Кроме того, хлопьевидный материал частично разрушается коллагеназой, что, по-видимому, свидетельствует о наличии в нем и растворимого коллагена [Friederickson R. G., Low F. N., 1971; Neuman Т. L„ Low F. N. 1973].
Исследования
Некоторые из этих положений подтверждаются при ультраструктурном и гистохимическом анализе развивающейся соединительной ткани. Как показывают наши исследования, в процессе фибриллогенеза в межклеточном веществе наблюдаются следующие основные компоненты: 1) аморфный хлопьевидный материал, 2) микрофибриллы диаметром 4—12 нм без периодичности, но с четкообразной структурой, 3) тонкие коллагеновые фибриллы диаметром 14—30 нм с нечеткой периодичностью 64—67 нм и 4) «зрелые» коллагеновые фибриллы диаметром 40—150 нм (чаще 50—90 нм) с четким периодом, в котором видны дополнительные полосы (рис. 30). Первые два компонента ярко окрашиваются рутениевым красным, что свидетельствует о том, что в их составе преобладают протеогликаны и гликопротеины; незрелые и зрелые КФ имеют узкий рутениево – положитёльный «чехол», особенно четко выявляющийся на поперечных срезах. По мере созревания соединительной ткани соотношение между перечисленными компонентами резко изменяется. В самые начальные периоды роста, когда между пролиферирующими фибробластами при световой микроскопии толуидиновым или алциановым синим обнаруживается накопление ГАГ и видны лишь единичные аргирофильные волокна, при ультраструктурном анализе преобладает хлопьевидный материал, в котором беспорядочно расположены микрофибриллы и тонкие коллагеновые фибриллы с нечеткой периодичностью. Фазе аргирофиль – ных и метахромазирующих (так называемых преколлагеновых) волокон’ на ультраструктурном уровне соответствует накопление тонких коллагеновых фибрилл и появление более толстых«зрелых» коллагеновых фибрилл с четким периодом . Отмечается тенденция к формированию волокон (пучков фибрилл), последние на этом этапе состоят из слабо ориентированных коллагеновых фибрилл, микрофибрилл и хлопьевидного материала. Соотношение этих компонентов различается даже в близлежащих волокнах; преобладают или микрофибриллы, или хлопьевидный материал, или коллагеновые фибриллы, что, по-видимому, отражает степень созревания волокон.