Уменьшение количества хлопьевидного материала
Уменьшение количества хлопьевидного материала по мере созревания ткани, очевидно, связано с частичным разрушением протеогликанов и включением оставшихся протеогликанов в состав волокон. Действительно, наши данные с использованием рутениевого красного подтверждают это предположение. В развивающейся соединительной ткани, кроме упомянутых хлопье-видного материала и микрофибрилл, определяется несколько других рутениевоположительных протеогликановых структур, непосредственно связанных с коллагеновыми фибриллами: 1) аморфный «чехол» вокруг фибрилл; 2) пояса над большими периодами фибрилл; 3) тонкие микрофиламенты диаметром 3—4 нм, обычно прикрепляющиеся к коллагеновым фибриллам в участках больших периодов и соединяющие соседние фибриллы (рис. 33). Подобные рутениевоположительные структуры были обнаружены не только в развивающейся [Merker U., Gun - ter Т., 1973], но и в зрелой соединительной ткани кожи [Омель - яненко Н. П., 1977; Kajikawa К-, 1970; Graniowska М., 1976], в синовиальной оболочке и роговице [Myers D. В. et al., 1969, 1973], аорте [Myers D. В. et al., 1973; Eisenstein R. et al., 1976], хряще [Thyberg J., 1977]. По-видимому, стабилизирующие поперечные связи между коллагеновыми фибриллами осуществляются, за счет тонких микрофиламентов. Близкие результаты были получены при использовании других методов выявления протеогликанов (см. раздел 2.1.3). Менее ясным является вопрос о микрофибриллярных элементах. К ним причисляют структуры толщиной менее 20 нм, в которых не обнаруживается периодичность 64 нм; наименьшие из них имеют диаметр 3—4 нм [Low F. W., 1962; 1968; На - ust М. D., 1965; Anderson Н. С., Sajdera S. W., 1971; Morse D. Е„ Low F. N., 1974]. В развивающейся соединительной ткани они содержатся в большем количестве, чем в тканях зрелого организма. Первоначально эти структуры относили к первичным агрегатам коллагена [Karrer Н. Е., I960; Chapman J. А., 1961; Zellickson A. S. et al., 1963; Haust M. D., 1965; Gieseking R., 1966], считая, что коллагеновые фибриллы образуются в результате их соединения. Однако серией работ F. В. Low и соавт. [Frederickson R. G., Low F. N. 1971; Neuman Т. L., Low F. N., 1972; Morse D. E„ Low F. N. 1974; Frederickson R. G. et al, 1977], использовавшими предварительное ферментативное разрушение, было показано, что микрофибриллы устойчивы к кол – лагеназе, но разрушаются гиалуронидазой, «-амилазой и трипсином. На этом основании авторы считают, что микрофибриллы состоят не из коллагена, а из белково-полисахаридных комплексов. Путем аккумуляции на них молекул растворимого коллагена и соединения между собой они формируют коллагеновые фибриллы. В определенной степени это противоречит представлениям о самосборке коллагеновых фибрилл из молекул коллагена. Представляется более вероятным, что микрофибриллы служат «матрицей», направляющей агрегацию молекул и образование первичных филаментарных агрегатов коллагена, соединяющихся затем в фибриллу. Возможно, часть наиболее тонких микрофибрилл (4—5 нм) представлена именно этими филаментами. В принципе, это соответствует представлениям L. Robert и В. Robert (1974) о структурных гликопротеинах как о «матрице» для агрегации коллагена, подобному тому, как гликопро – теиновые микрофибриллы служат такой же «матрицей» для отложения эластина при формировании эластических волокон (см. разделы 2.1.2 и 2.3.2). При образовании коллагеновых волокон, согласно моделям D. S. Jackson и J. P. Bentley (1968) и Н. В. Mathews (1965), гликопротеины и протеогликаны входят в их состав, причем первые скрепляют между собой первичные агрегаты (филаменты или протофибриллы), а вторые — фибриллы . D. С. Pease и М. Bouteile (1971) действительно выявили с помощью окраски фосфорно-вольфрамо – вой кислотой углеводные компоненты внутри диспергированных коллагеновых фибрилл (в межфиламентарном пространстве). Таким образом, гликопротеины и протеогликаны не только регулируют рост и ориентация коллагеновых фибрилл, но и стабилизируют структуру волокон.